- Incubation temperature
- Ce produit peut être conservé à -20°C pendant 12 mois à l'abri de la lumière.
- Assay type
- Kits de dosage
- Detection method
- Méthode fluorimétrique,Cytométrie en flux
- Technical note
- Le cycle cellulaire désigne l'ensemble du processus allant de la fin d'une mitose à la fin de la suivante. Au cours de ce processus, le matériel génétique est répliqué et doublé, puis réparti uniformément entre deux cellules filles à la fin de la division. Le cycle cellulaire peut également être divisé en phases telles que l'interphase et la métaphase. La phase intercellulaire peut aussi être divisée en dormance (gap zéro, G0), prophase de synthèse d'ADN (premier gap, G1), anaphase de synthèse d'ADN (synthèse, S) et anaphase de synthèse d'ADN (deuxième gap, G2). La détection de l'ADN peut être utilisée pour refléter l'état de chaque phase du cycle cellulaire, également appelée prolifération cellulaire. L'ADN peut se lier à des colorants fluorescents (tels que le Cycle Green) ; les colorants fluorescents se liant à l'ADN à différents stades sont différents, et l'intensité de fluorescence détectée par cytométrie en flux peut également être utilisée pour détecter différentes phases du cycle cellulaire. Lorsque des cellules apoptotiques apparaissent, des corps apoptotiques sont produits en raison de la concentration et de la nucléolyse du cytoplasme et de la chromatine, ce qui modifiera les propriétés de diffusion de la lumière des cellules. Au stade précoce de l'apoptose, la diffusion frontale (FSC) des cellules diminue significativement, tandis que la diffusion latérale (SSC) augmente ou reste inchangée. Au stade tardif de l'apoptose, les signaux FSC et SSC diminuent tous les deux. Par conséquent, les cellules apoptotiques peuvent être observées en mesurant les changements de diffusion de la lumière par cytométrie en flux. Après coloration au Cycle Green, en supposant que l'intensité de fluorescence des cellules en phase G0/G1 est de 1, la valeur théorique de l'intensité de fluorescence des cellules en phase G2/M contenant un ADN génomique double est de 2, et l'intensité de fluorescence des cellules en phase S subissant une réplication de l'ADN est entre 1 et 2. Les cellules apoptotiques ont perdu une partie de la fragmentation de l'ADN génomique en raison de la concentration du noyau et de la fragmentation de l'ADN. Par conséquent, les cellules apoptotiques ont montré une faible coloration évidente après coloration au Cycle Green et l'intensité de fluorescence était inférieure à 1. Le pic sub-G1 est apparu sur la carte de fluorescence par cytométrie en flux, ce qui correspond à la cellule apoptotique. Le kit peut être utilisé pour détecter le contenu d'ADN (cycle cellulaire) de cellules cultivées (cellules en suspension ou adhérentes).
