- Incubation temperature
- Dieses Produkt kann bei -20 °C für 12 Monate unter Lichtschutz gelagert werden.
- Assay type
- Assay-Kits
- Detection method
- Fluorometrische Methode,Durchflusszytometrie
- Technical note
- Der Zellzyklus bezieht sich auf den gesamten Prozess vom Ende einer Mitose bis zum Ende der nächsten. Während dieses Prozesses wird das genetische Material repliziert und verdoppelt und am Ende der Teilung gleichmäßig auf zwei Tochterzellen verteilt. Der Zellzyklus kann auch in Phasen wie Interphase und Metaphase unterteilt werden. Die Interzellulärphase kann auch in Ruhephase (Null-Gap, G0), Prophase der DNA-Synthese (erste Gap, G1), Anaphase der DNA-Synthese (Synthese, S) und Anaphase der DNA-Synthese (zweite Gap, G2) unterteilt werden. Die DNA-Detektion kann verwendet werden, um den Status jeder Phase des Zellzyklus widerzuspiegeln, was auch als Zellproliferation bezeichnet wird. DNA kann an Fluoreszenzfarbstoffe (wie Cycle Blue) binden, wobei die an DNA in verschiedenen Stadien bindenden Fluoreszenzfarbstoffe unterschiedlich sind, und die mittels Durchflusszytometrie detektierte Fluoreszenzintensität kann auch zur Detektion verschiedener Phasen im Zellzyklus verwendet werden. Wenn apoptotische Zellen auftreten, entstehen aufgrund der Konzentration und Nukleolyse von Zytoplasma und Chromatin apoptotische Körper, die die Lichtstreuungseigenschaften der Zellen verändern. Im Frühstadium der Apoptose nahm die Vorwärtsstreuung (FSC) der Zellen signifikant ab, während die Seitenstreuung (SSC) zunahm oder unverändert blieb. Im Spätstadium der Apoptose nahmen sowohl FSC- als auch SSC-Signale ab. Daher können apoptotische Zellen durch Messung der Änderungen der Lichtstreuung mittels Durchflusszytometrie beobachtet werden. Nach der Färbung mit Cycle Blue, unter der Annahme, dass die Fluoreszenzintensität von Zellen in der G0/G1-Phase 1 beträgt, beträgt der theoretische Wert der Fluoreszenzintensität von Zellen in der G2/M-Phase, die doppelte genomische DNA enthalten, 2, und die Fluoreszenzintensität von Zellen in der S-Phase, die eine DNA-Replikation durchlaufen, liegt zwischen 1 und 2. Apoptotische Zellen verloren aufgrund von Kernkonzentration und DNA-Fragmentierung einen Teil der genomischen DNA-Fragmentierung. Daher zeigten apoptotische Zellen nach der Cycle Blue-Färbung eine deutliche schwache Färbung und die Fluoreszenzintensität war kleiner als 1. Der Sub-G1-Peak erschien auf der Durchflusszytometrie-Fluoreszenzkarte, was apoptotische Zelle ist. Das Kit kann zur Detektion des DNA-Gehalts (Zellzyklus) von kultivierten Zellen (Suspensions- oder Adhärenzzellen) verwendet werden.
