- Incubation temperature
- Dieses Produkt kann bei 2~8°C/-20°C für 12 Monate lichtgeschützt gelagert werden. Die spezifischen Lagerbedingungen der Komponenten entnehmen Sie bitte dem Handbuch.
- Assay type
- Assay-Kits
- Detection method
- Fluorometrische Methode,Durchflusszytometrie
- Technical note
- Der Zellzyklus bezieht sich auf den gesamten Prozess vom Ende einer Mitose bis zum Ende der nächsten. Während dieses Prozesses wird das genetische Material repliziert und verdoppelt und am Ende der Teilung gleichmäßig auf zwei Tochterzellen verteilt. Der Zellzyklus kann auch in Phasen wie Interphase und Metaphase unterteilt werden. Die Interzellularphase kann auch in Ruhephase (Null-Lücke, G0), Prophase der DNA-Synthese (erste Lücke, G1), Anaphase der DNA-Synthese (Synthese, S) und Anaphase der DNA-Synthese (zweite Lücke, G2) unterteilt werden. Die DNA-Detektion kann verwendet werden, um den Status jeder Phase des Zellzyklus widerzuspiegeln, was auch als Zellproliferation bezeichnet wird. DNA kann an Fluoreszenzfarbstoffe (wie Propidiumiodid-PI) binden, die an DNA in verschiedenen Stadien bindenden Fluoreszenzfarbstoffe sind unterschiedlich, und die durchflusszytometrisch detektierte Fluoreszenzintensität kann auch zur Detektion verschiedener Phasen im Zellzyklus verwendet werden. Wenn apoptotische Zellen auftreten, werden aufgrund der Konzentration und Nukleolyse von Zytoplasma und Chromatin apoptotische Körper gebildet, die die Lichtstreueigenschaften der Zellen verändern. Im frühen Stadium der Apoptose nahm die Vorwärtsstreuung (FSC) der Zellen signifikant ab, während die Seitenstreuung (SSC) zunahm oder unverändert blieb. Im späten Stadium der Apoptose nahmen sowohl die FSC- als auch die SSC-Signale ab. Daher können apoptotische Zellen durch Messung der Veränderungen der Lichtstreuung mittels Durchflusszytometrie beobachtet werden. Nach der PI-Färbung, unter der Annahme, dass die Fluoreszenzintensität von G0/G1-Phasenzellen 1 beträgt, ist der theoretische Wert der Fluoreszenzintensität von G2/M-Phasenzellen, die doppelte genomische DNA enthalten, 2, und die Fluoreszenzintensität von S-Phasenzellen, die sich in der DNA-Replikation befinden, liegt zwischen 1 und 2. Apoptotische Zellen verloren einen Teil der genomischen DNA-Fragmentierung aufgrund von Kernkonzentration und DNA-Fragmentierung. Daher zeigten apoptotische Zellen nach der PI-Färbung eine deutliche schwache Färbung und die Fluoreszenzintensität war kleiner als 1. Der Sub-G1-Peak erschien auf der durchflusszytometrischen Fluoreszenzkarte, bei dem es sich um apoptotische Zellen handelt. Das Kit kann verwendet werden, um den DNA-Gehalt (Zellzyklus) von kultivierten Zellen (Suspensions- oder Adhärenzzellen) zu bestimmen.
