- Incubation temperature
- Ce produit peut être conservé à -20°C pendant 12 mois à l'abri de la lumière.
- Assay type
- Kits de dosage
- Detection method
- Méthode fluorimétrique,Cytométrie en flux
- Technical note
- Le kit de double coloration Calcein AM/PI Elabscience® peut être utilisé pour distinguer les cellules mortes des cellules vivantes chez les mammifères présentant une activité estérase. La Calcein AM est l'ajout d'un groupe acétyl méthoxy méthyl ester (AM) à la Calcein traditionnelle, ce qui augmente son hydrophobie et lui permet de pénétrer facilement la membrane des cellules vivantes pour entrer dans la cellule. La Calcein AM elle-même n'a pas de fluorescence. Après être entrée dans la cellule, elle est hydrolysée par l'estérase endogène de la cellule pour produire de la Calcein, une molécule polaire fortement chargée négativement et qui ne peut pas être retenue dans la cellule à travers la membrane cellulaire, tandis que la Calcein peut émettre une forte fluorescence verte ( Ex / Em = 494 nm / 517 nm ). En raison du manque d'estérase, les cellules mortes ne peuvent pas ou produisent rarement de la Calcein, de sorte que seules les cellules vivantes sont colorées avec une forte fluorescence verte, et les cellules mortes ne peuvent pas être colorées ou très faiblement. La perméabilité sélective de la membrane des cellules mortes est perdue, et l'iodure de propidium (PI) peut pénétrer dans la cellule pour se lier spécifiquement à l'ADN double brin et produire une forte fluorescence rouge (Ex/Em = 535 nm/617 nm) pour marquer les cellules mortes. Par conséquent, la combinaison de Calcein AM et de PI peut effectuer une double coloration fluorescente sur les cellules vivantes et les cellules mortes en même temps, ce qui peut être utilisé pour la détection de l'activité cellulaire et de la cytotoxicité.
